液质联用研究骨碎补提取物给予大鼠后柚皮苷及其代谢物柚皮素的药动学行为

目的:建立超高效液相色谱-_串联质谱法(UPLC-MS/MS)研究柚皮苷及其代谢物柚皮素在大鼠体内的药动学行为.方法:骨碎补药材中加入50%乙醇加热回流1 h,提取物用50%PEG400制成混悬液灌胃给予大鼠.血浆样品处理采用液液萃取法,以乙酸乙酯为提取试剂.对乙酰氨基酚为内标.色谱条件采用ACQUITY UPLCTM BEH C18色谱柱,流动相为乙腈-0.4%冰醋酸(80:20,V/V),流速为0.25 mL·min-1,柱温为25℃;质谱条件采用ESI源,负离子检测方式,多反应监测(MRM).用于定量分析的离子反应分别为m/z 578.4→270.7(柚皮苷)、m/z 270.7→150.7(柚皮素)和m/z 149.9→106.6(内标).结果:柚皮苷和柚皮素的Cmax分别为(2.56±0.77)×103ng·mL-1和222±45 ng·mL-1,Tmax分别为0.67 ±0.20h和8.0±1.3 h,AUC0-t分别为(3.23 ±0.54)×103ng·mL-1·h和(1.57±0.37)×103 ng·mL-1·h,AUC0-∞分别为(3.29±0.54)×103ng.mL-1·h和(1.79±0.43)×103ng.mL-1·h.柚皮苷的t1/2为4.1±0.8h.且在其药时曲线8h处出现另一微小的峰.结论:所建立的UPLC-MS/MS方法符合生物样品分析要求,药动学研究结果为骨碎补的临床应用提供了参考.