阻断ERK途径对地塞米松诱导胸腺细胞凋亡中线粒体膜电势的影响

目的:研究阻断ERK途径对地塞米松(DEX)诱导的胸腺细胞凋亡中线粒体膜电势的影响。方法:利用PD098059(PD)阻断小鼠胸腺细胞ERK途径,分别设对照组(control)、单纯PD组(PD only)、DEX组和PD+DEX组;在3h、5h和7h时点,利用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡;在3h、7h和11h,利用JC-1染色流式细胞术检测线粒体膜电势(△ψm)变化。结果:在1μmol·L-1DEX刺激下,小鼠胸腺细胞在3h、5h和7h凋亡率分别为(19·63±0·35)%、(41·84±1·67)%和(67·00±2·43)%,对照组分别为(4·98±0·39)%、(6·08±0·33)%和(9·31±0·34)%,差异显著(P<0·01);相同时点下,PD only组细胞凋亡率分别为(7·95±0·60)%、(10·69±0·48)%和(22·20±1·24)%,显著高于对照组(P<0·01);PD+DEX组在3h和5h时点细胞凋亡率显著高于DEX组(P<0·01),而在7h时点,两组差异不显著(P>0·05)。在3h、7h和11h,DEX组△ψm降低的细胞比率分别为(21·23±1·43)%、(55·34±1·78)%和(70·88±2·87)%,对照组分别为(5·25±1·22)%、(8·01±0·97)%和(12·88±1·10)%,差异显著(P<0·01);相同时点下,PD only组△ψm降低的细胞比率分别为(11·09±2·00)%、(16·21±2·25)%和(21·15±3·70)%,显著高于对照组(P<0·01);PD+DEX组在3h和5h时点细胞凋亡率显著高于DEX组,分别为(30·55±2·99)%和(65·22±4·32)%(P<0·01),11h时点两组差异不显著(P>0·05)。结论:DEX诱导小鼠胸腺细胞凋亡至少部分通过ERK途径,阻断ERK途径在该凋亡过程中具有重要生物学意义。