RT-LAMP法快速检测人季节性流感病毒

目的建立并应用RT–LAMP法检测人季节性流感病毒。方法选择并合成针对甲1型、甲3型、乙型流感病毒基因的保守区引物,并对南京地区2007年11月～2009年2月400份临床流感样患者的咽拭子标本进行检测。这些样本同时用MDCK细胞进行流感病毒的分离,用特异性单抗血凝抑制试验进行亚型鉴定。结果用该法从57份临床流感样患者的咽拭子标本中检测出流感病毒,其中49份为甲1型,6份为甲3型,2份为乙型。用MDCK细胞分离鉴定出55份阳性,其中47份为甲1型,6份为甲3型,2份为乙型。两种方法的检测结果无统计学差异(P>0.05)。RT–LAMP法为等温扩增,可用水浴锅代替PCR仪,检测结果在可见光下或紫外灯下直接肉眼观察。结论 RT–LAMP法对人季节性流感病毒的检测有高度的特异性,对禽流感病毒H5、H9无交叉反应,可用于季节性流感病毒的亚型鉴定。