果蝇唾液腺特异基因CG8419多克隆抗体的制备及检测

ZHOU Huang,TANG Xiong-zhuo,MIN Lu,CHEN Ting-fang,PENG Xi-yang,WANG Kun,WU Xiu-shan,WANG Yue-qun

Life Science Research（2011）

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摘要

果蝇CG8419基因与脊椎动物中TRIM45基因为同源基因.以果蝇cDNA为模板通过PCR扩增出亲水性和特异性好的果蝇CG8419基因片段,将其克隆入表达载体PET-28a,构建出重组表达质粒PET-28a-CG8419.将重组质粒转化大肠杆菌Rosetta,经IPTG诱导出带His标签的重组融合蛋白.通过尿素洗涤包涵体并切胶回收纯化融合蛋白,然后再免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体.Western blot实验分别验证抗体的效价和特异性.果蝇胚胎抗体染色显示该基因在果蝇唾液腺中表达.

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关键词

polyclonal antibody,prokaryotic expression,CG8419

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