中国实验用小型猪肾小管的发育及各节段标志物的表达

目的:明确解剖和生理上与人非常接近的中国实验用小型猪肾脏发育过程中肾小管的形态学变化和肾小管各节段的特异性标志物.方法:采用高碘酸-希夫(PAS)染色和免疫荧光染色技术,系统观察中国实验用小型猪妊娠28~112 d(E28 d~E112 d)和出生后1 d、7 d、14 d、21 d(P1 d~21 d),共17个不同时间点猪肾小管的发育及肾小管特异性标志物雪莲花凝集素(LTL)、水通道蛋白1(AQP1)、钙结合蛋白(calbindin)-D28k在肾小管不同节段的表达.结果:(1)中国实验用小型猪E28 d可见后肾间充质和输尿管芽,即后肾已经开始发育;但这时还没有肾小管.E35 d可见不同节段的肾小管,即肾小管已开始发育.从E35 d~P14 d(E112 d仔猪出生),肾皮质均有生肾区存在,即不断有新的肾单位发生;P21 d生肾区消失,即不再有新的肾单位产生.(2)① LTL在E28 d表达在输尿管芽,E35 d开始在近端小管表达,以刷状缘表达最为明显;表达由弱到强,由点状到线状.② AQP1在E28 d未见表达,E35 d开始表达;AQP1表达在近端小管和髓袢的降支细段,主要表达在细胞膜,尤其在管腔侧的表达更为明显.③ Calbindin-D28k在E28 d表达在输尿管芽,E35 d开始表达在远端小管和集合管;Calbindin-D28k主要表达在细胞质,随着肾小管发育,表达逐渐增强.(3)发现集合管来源于输尿管芽,发源于输尿管芽的集合管从被膜下的生肾区一直延伸到肾髓质.结论:中国实验用小型猪妊娠35 d可以见到不同节段肾小管.LTL、AQP1、Calbindin-D28k可以分别作为猪近端小管、髓袢、远端小管和集合管的标志物.