针刺预处理全脑缺血大鼠海马CA1区细胞凋亡和热休克蛋白70 mRNA的表达

目的:探讨针刺预处理对全脑缺血大鼠海马CA1区细胞凋亡及热休克蛋白70mRNA表达的影响,并与缺血预处理的效果进行比较.方法:实验于2003-10在黑龙江中医药大学神经解剖实验室进行.取120只Wistar大鼠随机分为5组,每组24只:[1]正常对照组:不干预.[2]假手术组:暴露4条血管,不造模.[3]脑缺血组:四动脉阻断法全脑缺血10 min制作大鼠全脑缺血模型.[4]脑缺血预处理组:预全脑缺血3 min,再灌注24 h后再次全脑缺血10 min.[5]针刺预处理组:术前7 d给予针刺,双侧足三里、曲池穴,双侧连接全能脉冲电疗仪,频率为1 Hz,电压为2 V,30 min/次,针刺百会30 min/次,1次/d,7 d后全脑缺血10 min.每组分别于再灌注12,24,48和72 h麻醉状态下取材,采用原位缺口末端标记法检测大鼠脑海马CA1区凋亡细胞数,免疫组织化学法检测大鼠脑海马热休克蛋白70阳性细胞数,原位分子杂交技术检测大鼠脑海马热休克蛋白70 mRNA表达.结果:经补充后120只大鼠进入结果分析.[1]脑海马CA1区凋亡细胞数:正常对照组和假手术组无;脑缺血组再灌注12 h即可见,且随时间延长逐渐增多,72h仍具有较高水平[(55.87±10.68)个/mm2],而脑缺血预处理组和针刺预处理组各时间点均显著低于脑缺血组(P＜0.05),但两组间无差异(P＞0.05).[2]脑海马热休克蛋白70阳性细胞数:正常对照组和假手术组无;脑缺血组少量表达,再灌注24h为高峰[(20.84±5.93)个/mm2],而脑缺血预处理组和针刺预处理组各时间点均显著高于脑缺血组(P＜0.05),但两组间无差异(P＞0.05).[3]脑海马热休克蛋白70 mRNA阳性细胞数:正常对照组和假手术组无;脑缺血组少量表达,再灌注48 h为高峰[(19.44±5.55)个/mm2],而脑缺血预处理组和针刺预处理组各时间点均显著高于脑缺血组(P＜0.05),但两组间无差异(P＞0.05).结论:针刺预处理的脑保护机制可能与抑制细胞凋亡及上调热休克蛋白70 mRNA、热休克蛋白70表达水平有关,其效果与脑缺血预处理相似.