烟酰胺对体外培养兔椎间盘细胞凋亡及能量代谢相关基因的影响

背景:前期研究已证实,烟酰胺能够促进椎间盘细胞的增殖并对白细胞介素1β致椎间盘退变起到保护作用,而烟酰胺对椎间盘退变的保护机制还不很清楚.目的:观察烟酰胺对白细胞介索1 β诱导体外培养的兔椎间盘细胞凋亡及能量代谢相关基因表达的影响.设计、时间及地点:实验于2007-11/2008-05在华中科技大学同济医学院附属协和医院中心实验室完成.材料:3-4月龄日本大白兔10只,体质量1.5-2.0kg,取L1-6脊柱节段56个椎间盘组织,用于构建兔椎间盘组织凝胶培养模型.方法:将56枚椎间盘随机分为4组,每组14枚.正常对照组:不加入药物;烟酰胺组:加入0.5 g/L烟酰胺;退变组;加入10 μg/L白细胞介素1β;治疗组加入10 μ g/L白细胞介素1β及0.5 g/L烟酰胺.培养2周后对各组标本行TUNEL染色及Fas,Caspase-3,Bcl-2,低氧诱导因子1α、葡萄糖转运体1、血管内皮细胞生长因子免疫组织化学染色.主要观察指标:各组标本TLINEL染色及免疫组织化学染色阳性细胞率.结果:TUNEL染色示加入烟酰胺后退变组阳性细胞率较正常对照组上升(P=0.001).Fas染色退变组阳性细胞率较正常对照组明显上升(P＜0.01).Bcl-2染色示烟酰胺组较正常对照组阳性细胞率升高(P=0.004).Caspase-3染色示治疗组阳性细胞率较退变组下降(P=0.024),但仍高于正常对照组(P=0.006).低氧诱导因子1 α染色示烟酰胺组阳性细胞率低于正常对照组(P＜0.01);退变组阳性细胞率较正常对照组上升(P＜0.01).葡萄糖转运体1染色示治疗组阳性细胞率高于正常对照组(P＜0.01).结论:烟酰胺可以抑制白细胞介素1β诱导的椎间盘细胞凋亡,改善白细胞介素1β导致的椎间盘能量代谢障碍.