通过快速定点突变表征人源含硒单链抗体酶的底物结合部位

Jian Song,XU Jun-Jie,WEI Jing-Yan,Yang Yu,SUN Wei-Guo,ZHANG Gui-Rong

CHEMICAL JOURNAL OF CHINESE UNIVERSITIES-CHINESE（2010）

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摘要

为了对人源含硒单链抗体酶Se-scFv-B3的底物结合部位和催化基团进行研究,在理论预测的基础上,通过快速定点突变法分别在2个理论预测的底物结合部位(位点1和位点2)内选定Ala180和Ala44定点突变为丝氨酸(Ser).2个突变体蛋白经化学修饰将Ser转变成谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)的催化基团硒代半胱氨酸(Sec)后,前者的GPX活力达到了Se-scFv-B3的2倍多,而后者的GPX活力没有明显提高,这表明位点1可能是主要的底物结合部位,与理论预测的结果一致.

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关键词

Quikchange site-directed mutagenesis,Human selenium-containing sigle chain abzyme,Substrate-binding site

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