人晚期糖基化终产物受体胞质内段融合蛋白表达载体的构建与表达
Di 1 jun yi da xue xue bao = Academic journal of the first medical college of PLA（2003）
摘要
目的构建人晚期糖基化终产物受体胞质内段(hRAGE-C)GST融合蛋白的重组原核基因表达载体并进行表达与纯化,研究其功能并鉴定与其相互作用的蛋白.方法采用PCR方法扩增hRAGE基因编码区的胞质内段,并将其重组于pGEX-KG载体中.重组质粒经PCR、酶切、序列鉴定分析后,转化大肠杆菌BL21,以异丙基β-D硫代半乳糖(IPTG)诱导产生hRAGE胞质内段的GST融合蛋白.结果PCR、酶切和测序结果表明所克隆的GST/hRAGE-C原核表达载体完全正确,继而表达、纯化获得了相对分子质量约35 000的融合蛋白(符合预期大小).结论将hRAGE胞质内段构建于含有GST标记的载体上并获得融合蛋白的高效表达.
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关键词
fusion protein,advanced glycation,human receptor,intracellular domain
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