日本血吸虫硫氧还蛋白谷胱甘肽还原酶免疫功能的研究

目的 研究日本血吸虫硫氧还蛋白谷胱甘肽还原酶(Thioredoxin Glutathione Reductase of Schistosoma japonicum,SjTGR)的免疫原性及抗日本血吸虫感染的免疫保护性作用.方法 75只小鼠随机分为5组:空白组、PBS组、CpG2免疫组、TGR免疫组和TGR+ CpG2联合免疫组,免疫3次.首次免疫前及第3次免疫后2周经尾静脉采血,采用酶联免疫法分别检测血清中抗SjTGR蛋白IgG、IgG1和IgG2a的抗体水平.第3次免疫后2周,每只小鼠经腹部感染日本血吸虫尾蚴40±2条,42 d后剖杀,收集成虫和虫卵,计算减虫率和减卵率;制备各组小鼠单个脾淋巴细胞,采用流式细胞术检测脾细胞表面标志物CD44high、CD4+CD44high或CD8+CD44high水平;用SjTGR刺激免疫小鼠脾细胞72 h,采用酶联免疫法检测脾细胞的IL-2、IL-4、IL-10和IFN-γ的水平.结果 第3次免疫后2周TGR与CpG2+ TGR免疫组小鼠血清抗SjTGR抗体的IgG滴度均达1:200000以上,IgG2a与IgG1的比值(IgG2a/IgG1)随时间的延长缓慢增高.TGR免疫组和TGR+CpG2联合免疫组细胞上清中的IFN-γ和IL-2水平与空白组、PBS组、CpG2免疫组相比明显增高(P＜0.05).TGR免疫组与TGR+ CpG2免疫组小鼠脾细胞的CD44high、CD8+CD44high及CD4+CD44high与空白组和PBS组相比细胞比值增加(P＜o.05).TGR免疫组和CpG2+ TGR免疫组的减虫率分别为9.4％,10.5％,减卵率分别为9.2％和32.8％.结论 SjTGR具有较强的免疫原性,可诱导小鼠免疫反应向Th1型极化,但不足以产生抗日本血吸虫感染的保护效应.CpG20DN可能是一种有效的Th1型免疫佐剂.