瑞舒伐他汀对同型半胱氨酸诱导的小鼠血管平滑肌细胞去分化和内质网应激的影响及其机制研究

目的:探讨瑞舒伐他汀(Rsv)对同型半胱氨酸(Hcy)诱导的小鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)去分化及内质网应激(ERS)的影响.方法:Hcy和不同浓度瑞舒伐他汀(0.1,1.0,10μmol/L)干预VSMCs,48h后检测细胞骨架及表型蛋白(α-SMA)、钙调节蛋白(calponin)和骨桥蛋白(OPN)变化,并检测ERS相关mRNA(Herpud1,XBP1s和GRP78)在不同时间点的水平;再在Hcy及Rsv干预基础上给予ERS抑制剂4-苯基丁酸(4-PBA)或诱导剂衣霉素来调控细胞ERS水平,检测细胞增殖、迁移和表型蛋白表达,明确ERS在Rsv表型保护中的作用;在Hcy及Rsv干预基础上给予雷帕霉素靶蛋白(mTOR)-P70S6激酶(P70S6K)信号抑制剂雷帕霉素或激活剂磷脂酸,检测mTOR-P70S6K磷酸化和ERS水平,明确mTOR-P70S6通路在Rsv调控ERS中的作用.结果:与Hcy组相比,Hcy+中Rsv组(1maol/L)和Hcy+高Rsv组(10 μmol/L)细胞骨架极性明显增强,α-SMA、calponin表达升高,而OPN及ERS相关mRNA水平显著降低(P＜0.01);与Hcy组比较,Hcy+ Rsv组和Hcy+ 4-PBA组增殖、迁移水平降低(P＜0.01),收缩蛋白表达增强,但衣霉素干预则逆转了Rsv的上述作用;与Hcy组相比,Hcy+ Rsv组和Hcy+雷帕霉素组的mTOR-P70S6K磷酸化及ERS水平降低(P＜0.01),但磷脂酸干预抑制了Rsv对mTOR-P70S6K通路和ERS的影响.结论:瑞舒伐他汀可能通过mTOR-P70S6K通路抑制ERS水平,抑制Hcy诱导的小鼠VSMCs去分化改变.