用实时荧光定量PCR选择急性呼吸窘迫综合征患者血清microRNA内参照基因

目的 探讨用实时荧光定量PCR检测急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患者血清微小RNA(microRNA,miRNA)的表达并选择最优内参照基因.方法 用实时荧光定量PCR检测40例ARDS患者及20例体检健康者血清中5个miRNA候选内参照基因miR-16-5p、miR-93-5p、miR-101-3p、miR-191-5p和U6,并用geNorm法、NomFinder法、bestkeeper法和相对△Ct法4种算法分析内参照基因稳定性,通过对4种算法稳定值进行排序并计算几何均数的方法分析综合稳定值.结果 比较5个候选内参照基因在ARDS患者和体检健康者的表达水平,差异均无统计学意义(P均＞0.05).4种算法综合分析显示,miR-16-5p以最小的稳定值1.32成为综合稳定性最高的内参照基因,其次是miR-101-3p、U6、miR-93-5p和miR-191-5p.结论 实时荧光定量PCR法确定ARDS患者血清miRNA最优的内参照基因为miR-16-5p.