低能量激光照射对脂肪源性干细胞临床治疗潜能影响的实验研究

目的 观察镓铝砷(GaAlAs)激光对脂肪源性干细胞(ADSCs)增殖、细胞因子分泌及成脂分化能力的影响,探讨临床治疗过程中提高ADSCs治疗效果的有效方法.方法 取来自腹部脂肪抽吸术女性患者的脂肪组织,分离ADSCs,建立人脂肪源性干细胞(hADSCs)培养体系;用650nm波长GaAlAs激光以不同能量(2、4、8J/cm2)对hADSCs进行照射.采用MTT法检测hADSCs的增殖能力,ELISA法检测hADSCs的分泌功能,实时定量PCR法检测细胞表型的变化,油红O染色检测激光照射对hADSCs成脂分化能力的影响.结果 MTT法检测结果显示:照射后第4、6天时2J/cm2照射组吸光度值与对照组无明显差异(P＞0.05),4、8J/cm2照射组吸光度值与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05),其中4J/cm2照射组吸光度差异最为明显.ELISA法检测结果显示:4J/cm2照射组上清液中血管内皮生长因子(VEGF)、血小板衍生生长因子(PDGF)、转化生长因子β(TGF-β)的蛋白含量分别为287.5±15.2pg/ml、36.0±0.7ng/ml、292.6±10.5pg/ml,明显高于对照组(分别为145.3±21.6pg/ml、26.7±0.6ng/ml、130.6±6.0pg/ml),差异有统计学意义(P＜0.05).荧光定量PCR检测结果显示:经4J/cm2 GaAlAs激光照射后hADSCs中细胞表面标记物CD13、CD29、CD44、CD90 mRNA的相对表达量分别为对照组的1.19、22.05、4.38、7.22倍,两组间比较差异有统计学意义(P＜0.05).油红O染色显示,经GaAlAs激光照射后hADSCs的成脂分化能力明显高于对照组.结论 低能量激光照射可增强ADSCs的增殖、分泌及成脂分化能力,可能有助于提高其临床治疗效果,是一种简便、安全、有效的方法.