原代人心包间质细胞的分离培养方法及鉴定

目的 建立原代人心包间质细胞分离、培养方法.方法 将心包组织标本剪切成1 mm×1 mm×1 mm大小,采用Ⅱ型胶原酶与透明质酸酶联合胰蛋白酶消化分离、培养获得细胞.观察细胞形态,测定细胞倍增时间,应用流式细胞术与免疫组织化学染色对细胞进行鉴定.结果 分离培养的细胞接种24 h后有细胞贴壁生长,10 d左右细胞融合,可进行传代培养.细胞呈梭形或纺锤样外观,细胞核明显、核仁清晰、核质比例大.流式细胞术检测显示细胞表面标记物CD34(-)、CD45(-),免疫组织化学检测显示CK(-)、vimentin(+)、α-SMA(+).10例心包组织采用上述方法分离培养细胞,其中8例获得成功.结论 本方法可高效地分离、培养原代人心包间质细胞,为缩窄性心包炎体外研究提供了途径.