姜黄素抑制食管癌KYSE70细胞上皮-间质转化

目的:探讨姜黄素对转化生长因子β1(transforming growth factor-beta1,TGF-β1)诱导的食管癌KYSE70细胞上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transformation,EMT)的影响.方法:不同浓度姜黄素处理KYSE70细胞12、24、48和72 h后,应用CCK-8法检测细胞的增殖情况.应用姜黄素(20 μmog1/L)、TGF-β1 (10ng/mL)和姜黄素(20 μmol/L)联合TGF-β1 (10 ng/mL)处理KYSE70细胞后,在光学显微镜下观察细胞的形态,Transwell小室法检测各组细胞的侵袭能力,FCM法检测各组细胞的细胞周期分布,实时荧光定量PCR法和蛋白质印迹法分别检测各组细胞中EMT相关标志物E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(vimentin) mRNA及蛋白的表达.结果:不同浓度姜黄素作用不同时间均能抑制食管癌KYSE70细胞的增殖(P值均＜ 0.01).TGF-β1处理后,食管癌KYSE70细胞形态向间质细胞转变,呈长梭形,但这种转变可以被姜黄素抑制.TGF-β1处理组细胞中G0/G1期细胞所占百分比低于对照组(KYSE70细胞未进行任何处理)(P=0.021);姜黄素联合TGF-β1处理组细胞中S期细胞所占百分比高于TGF-β1处理组(P＜0.001),而G2/M期细胞所占百分比低于TGF-β1处理组(P＜0.001).TGF-β1处理组的细胞侵袭数多于对照组(P＜0.001),姜黄素处理组的细胞侵袭数少于对照组(P＜0.001),姜黄素联合TGF-β1处理组的细胞侵袭数少于TGF-β1处理组(P＜0.001).TGF-β1处理组细胞中E-cadherin mRNA (P=0.045)和蛋白(P=0.008)的表达水平均低于对照组,而N-cadherin和vimentin mRNA (P=0.003和P＜0.001)及蛋白(P值均＜ 0.001)的表达水平均高于对照组;姜黄素联合TGF-β1处理组细胞中E-cadherin mRNA (P=0.005)和蛋白(P=0.006)的表达水平均高于TGF-β1处理组,而N-cadherin和vimentin mRNA(P=0.010和P＜ 0.001)及蛋白(P值均＜0.001)的表达水平均低于TGF-β1处理组.结论:姜黄素可抑制食管癌KYSE70细胞的增殖和侵袭,还可有效抑制EMT的发生.