木鳖子淫羊藿合用配比筛选及机制研究

对木鳖子、淫羊藿进行配比筛选,以得到低毒高效的抗肿瘤中药组方,并研究药物合用后,对肿瘤细胞凋亡及相关蛋白的影响,进而揭示木鳖子、淫羊藿合用的抗肿瘤作用机制.采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法观察木鳖子、淫羊藿提取物合用对不同组织来源的肿瘤细胞增殖的影响.通过Compusyn软件分析2味药合用对肿瘤细胞的影响.以平板克隆形成实验观察木鳖子、淫羊藿合用对A549细胞体外增殖的影响.并通过ROS(活性氧)检测试剂盒及Western blot法比较药物作用后细胞内ROS及凋亡相关蛋白p53,Bcl-2,Bax的表达.通过Lewis肺癌模型,观察药物体内抗肿瘤效果.结果 显示,木鳖子、淫羊藿醇提物抗肿瘤效应比水提物显著,而以1:1合用时抗增殖作用最强(P＜0.05).Compusyn分析显示2味药合用具有协同增效的作用.进一步研究显示,木鳖子、淫羊藿合用后A549细胞克隆原形成数目显著减少(P＜0.01),细胞内ROS产生增多,凋亡相关蛋白p53表达上调,Bcl-2/Bax比值下降.小鼠体内给药亦发现,给药高剂量组肿瘤抑制率达53.06％ (P＜0.05).与2味药单用相比,木鳖子、淫羊藿合用抗肿瘤增殖更显著,最佳配比为1∶1.木鳖子-淫羊藿1∶1合用对多种肿瘤细胞均有抑制增殖的作用,且与其他配比相比,对正常肝细胞L02的生长无显著影响,初步推测2味药合用具有增效减毒的作用.进一步研究显示,其能显著抑制A549细胞的增殖,作用机制与激活细胞内源性凋亡通路有关.体内动物实验亦显示,随着给药浓度的升高,肿瘤抑制率有所上升.