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小干扰RNA靶向保罗样激酶1基因沉默抑制结肠癌侵袭与增殖的研究

Chinese Journal of Experimental Surgery(2019)

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摘要
目的 探讨小干扰RNA (siRNA)靶向沉默保罗样激酶1(PLK1)对结肠癌侵袭与增殖的影响.方法 收集2013年7月至2018年9月海南医学院第二附属医院收治的结肠癌患者68例,其中男40例,女28例,平均年龄(47.5±6.2)岁.蛋白质印迹法(Western blot)和实时定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)分别检测PLK1蛋白和mRNA水平.细胞体外侵袭实验(Transwell)和细胞增殖与毒性(CCK-8)法检测细胞侵袭和增殖能力.构建皮下异种移植裸鼠结肠癌模型进行动物实验.计量资料多组间比较采用F检验,两两比较采用t检验.率的比较采用x2检验.相关性分析采用斯皮尔曼(Spearman)法.结果 与癌旁组织(8.72±2.19)比较,结肠癌组织(15.34±3.86)PLK1的mRNA水平显著增高(f=12.593,P<0.05),且PLK1水平与肿瘤浸润深度(r=0.368,P<0.05)和TNM分期(r=0.403,P<0.05)呈正相关.与siRNA阴性对照[侵袭:(37.20±4.50)个]比较,PLK1-siRNA-1[侵袭:(15.00±3.75)个]和PLK1-siRNA-2[侵袭:(14.60±3.40)个]处理后SW480细胞侵袭能力均显著下降(t=5.073、4.985,P<0.05).在24、48、72 h时,与siRNA阴性对照[吸光度(A)值0.53±0.12、0.73±0.16、0.86±0.18]比较,PLK1-siRNA-1 (0.32±0.10、0.40±0.08、0.53±0.10)和PLK1-siRNA-2 (0.34±0.08、0.41±0.09、0.54±0.11)处理后细胞增殖能力均显著下降(t =4.167、4.990、4.833、4.001、4.708、4.665,P<0.05).与siRNA阴性对照[肿瘤体积:(849.12±65.37) mm3;结节数:(9.35±2.15)个]比较,经PLK1-siRNA-1[肿瘤体积:(135.06±9.11) mm3;结节数:1.46±0.20个]和PLK1-siRNA-2[肿瘤体积:(127.45±8.86) mm3;结节数:(1.30±0.15)个]处理的裸鼠肿瘤平均体积和腹膜内肿瘤结节数均显著降低(t=19.168、7.004、20.365、7.659,P<0.05).结论 靶向沉默PLK1可抑制结肠癌的侵袭与增殖.
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关键词
Colon cancer,Paul-like kinase 1,Invasion,Proliferation
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