小鼠主要组织相容性复合物基因各位点的提取和质粒的构建
Chineae Journal of Organ Transplantation（2010）
Abstract
目的 提取小鼠的主要组织相容性复合物(MHC)基因各个位点,构建质粒,以用于转基因实验.方法 提取小鼠RNA,逆转录cDNA,以嵌套聚合酶链反应(PCR)的方法扩增,将产物与T载体连接、克隆和测序;用内切酶切下,再与表达型载体连接,再次测序挑选克隆.结果 嵌套PCR后,产物通过测序证实为目的 基因序列,与T载体、表达型载体的连接和克隆后,经测序证实并挑选得到了正确的克隆.结论 MHC各位点基因可以通过嵌套PCR扩增获得;构建的表达型载体质粒可用于今后转入受者的实验.
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Key words
Major histocompatibility complex,Transplantation,Gene
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