创伤性脑损伤后大鼠海马区神经干细胞增殖及其与Janus激酶2/信号传导与转录激活因子3信号通路活性的关系

目的 探讨创伤性脑损伤(TBI)后大鼠海马区神经干细胞(NSCs)增殖能力及其与Janus激酶2/信号传导与转录激活因子3(JAK2/STAT3)信号通路活性的关系.方法 108只SD大鼠按随机数字表法分为对照组(36只)和TBI组(72只).利用PinPoint TM精密皮质撞击器构建TBI模型.伤后1,3,7,14,21和28 d,取大鼠脑组织进行免疫荧光染色以检测海马区NSCs[5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)+/干细胞关键蛋白-2 (Sox2)+]增殖情况;采用Western blot法检测磷酸化JAK2(p-JAK2)和磷酸化STAT3(p-STAT3)的表达水平,并分析二者的变化趋势.在初步分析伤后海马区NSCs增殖能力和JAK2/STAT3信号通路活性变化趋势的基础上,另取24只SD大鼠,按随机数字表法分为TBI+生理盐水组和TBI+ AG490(JAK2特异性抑制剂)组,每组12只.伤后7d,采用免疫荧光染色检测海马区NSCs增殖能力;采用Western blot法检测p-JAK2和p-STAT3的表达水平,从而进一步确认TBI后海马区NSCs的增殖能力与JAK2/STAT3信号通路的相关性.结果 与对照组比较,TBI组海马区NSCs细胞数量和p-JAK2、p-STAT3的表达量增多,且在伤后7d最显著(NSCs数量:对照组为31.2±4.7,TBI组为111.4 ±8.1;p-JAK2:对照组为1.11 ±0.09,TBI组为2.16±1.01;p-STAT3:对照组为1.05 ±0.06,TBI组为2.06±0.09)(P均＜0.01).TBI组海马区NSCs增殖能力与p-JAK2、p-STAT3表达量的变化趋势一致.伤后7d,TBI+ AG490组p-JAK2和p-STAT3的表达量及NSCs的增殖能力明显下降(p-JAK2:TBI+生理盐水组为2.18 ±0.15,TBI+ AG490组为1.24 ±0.10;p-STAT3:TBI+生理盐水组为2.21±0.12,TBI+ AG490组为1.25 ±0.11;NSCs:TBI+生理盐水组为112.8±8.6,TBI+ AG490组为75.5±6.4)(P均＜0.01).结论 TBI后大鼠海马区NSCs的增殖能力提高,JAK2/STAT3信号通路活性也增强,且两者有相同的变化趋势.JAK2抑制剂AG490可以降低JAK2/STAT3信号通路活性和NSCs的增殖能力.该结果可为促进TBI后神经再生与功能修复的相关研究提供参考.