京尼平交联兔角膜基质有效性和安全性在体研究

目的 观察不同质量分数京尼平交联活体正常兔角膜的有效性及对角膜基质细胞形态的影响.方法 选取40只健康新西兰白兔的右眼为实验眼,采用随机数字表法随机分为0.20％京尼平组、0.25％京尼平组、核黄素组和正常对照组.交联前、交联后7d及14d时,活体测量实验眼的平均角膜曲率(Km)和中央角膜厚度(CCT).角膜交联后7d和14d,各组分别取5只实验眼角膜进行单轴拉伸法测量应变为10％的角膜弹性模量和应力;使用普通光学显微镜和透射电子显微观察角膜基质细胞结构. 结果 各组交联前、交联后7d和14 d Km均数的总体比较,差异均无统计学意义(F时间=1.287,P=0.284;F组别=0.301,P=0.825).各组交联前、交联后7d和14 d CCT均数的总体比较,差异有统计学意义(F时间=3.786,P=0.029),与交联前相比,各组交联后7 d CCT均明显增加,差异均有统计学意义(均P＜0.05);各组间CCT比较,差异无统计学意义(F分组 =0.557,P=0.646).交联后7d,0.20％京尼平组、0.25％京尼平组、核黄素组和正常对照组的角膜弹性模量依次为(11.96±5.74)、(21.24±6.77)、(18.76±3.34)和(11.56±4.37) MPa,应力依次为(0.68±0.24)、(1.20±0.25)、(1.01±0.30)和(0.69±0.26) MPa;其中0.25％京尼平组弹性模量和应力高于0.20％京尼平组和正常对照组,差异均有统计学意义(均P＜0.05),核黄素组与0.25％京尼平组弹性模量和应力比较,差异均无统计学意义(均P＞0.05).交联后14 d,0.20％京尼平组、0.25％京尼平组、核黄素组和正常对照组的弹性模量依次为(16.65±3.19)、(19.12±2.39)、(22.83±4.38)和(12.70±2.72) MPa,应力依次为(0.83±0.12)、(0.97±0.04)、(1.23±0.30)和(0.65±0.20) MPa;其中核黄素组弹性模量和应力高于0.20％京尼平和正常对照组,差异均有统计学意义(均P＜0.05),核黄素组与0.25％京尼平组弹性模量比较,差异无统计学意义(P=0.090),核黄素组应力高于0.25％京尼平组,差异有统计学意义(P=0.046).光学显微镜下0.20％和0.25％京尼平组浅层角膜基质细胞密度降低,核黄素组浅层至中层角膜基质细胞消失.透射电子显微镜下可见,0.20％和0.25％京尼平组少量基质细胞内出现空泡,形态大致正常;核黄素组大量细胞凋亡,仅深层基质细胞形态正常.结论 0.25％京尼平可加强角膜的生物力学特性,达到与紫外线-核黄素交联相似的强度;0.20％及0.25％京尼平交联对角膜基质细胞的安全性优于紫外线-核黄素交联.