新一代结核分枝杆菌/利福平耐药实时荧光定量核酸扩增技术的临床应用研究

目的 评估新一代结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)/利福平(rifampin,RIF)耐药实时荧光定量核酸扩增(Xpert MTB/RIF Ultra)技术在快速检测MTB和RIF耐药中的临床应用价值.方法 2016年3月至2016年12月河南省胸科医院就诊的疑似肺结核和复治结核病患者,最终共111例纳入研究,其中结核发现组(case detection group,CDG)33例和耐药高风险组(drug resistant high-risk group,DRG)78例.收集患者痰标本,分析比较Xpert MTB/RIF Ultra技术与痰涂片、固体罗氏(Lowenstein-Jensen,L-J)培养、液体分枝杆菌(mycobacterial growth indicator tube,MGIT)培养和MTB/RIF耐药实时荧光定量核的扩增(Xpert MTB/RIF)技术检测MTB的灵敏度和特异度,采用Xpert MTB/RIF Ultra技术、表型药物敏感试验和Xpert MTB/RIF技术检测RIF耐药性.计数资料比较采用卡方检验,计量资料比较采用t检验.结果 以临床诊断为标准,CDG患者Xpert MTB/RIF Ultra技术检测MTB的灵敏度(75.8%)分别与痰涂片(66.7%)、L-J培养(63.6%)、MGIT培养(75.6%)、Xpert MTB/RIF技术(66.7%)比较,差异均无统计学意义(x2分别为0.67、1.15、0.00和0.67,均P>0.05).DRG患者Xpert MTB/RIF Ultra技术检测MTB的灵敏度(94.9%)优于L-J培养(55.1%)和MGIT培养(80.8%),差异均有统计学意义(x2分别为32.80和7.25,均P<0.05),与痰涂片(84.6%)和Xpert MTB/RIF技术(91.0%)比较差异均无统计学意义(x2分别为3.41和0.39,均P>0.05).Xpert MTB/RIF Ultra技术取得最终检测结果所需时间最短,为(1.76±0.18)h,与痰涂片[(5.04±0.49)h]、L-J培养[(31.67±0.56)d]、MGIT培养[(22.36±9.68)h]、Xpert MTB/RIF技术[(2.00±0.30)h]比较差异均有统计学意义(t分别为16.90、31.98、24.38和7.05,均P<0.01).以MTB培养阳性结果为标准,Xpert MTB/RIF技术和Xpert MTB/RIF Ultra技术检测MTB的灵敏度分别为93.2%和98.9%,特异度均为100%.在23例痰涂片阴性肺结核患者中,Xpert MTB/RIF Ultra技术灵敏度(52.2%)显著优于Xpert MTB/RIF技术(21.7%),差异有统计学意义(x2=4.98,P=0.025),特异度均为100%.以表型药物敏感试验结果为标准,44例有药物敏感试验结果的培养阳性患者中,以Xpert MTB/RIF和Xpert MTB/RIF Ultra技术检测RIF耐药的灵敏度分别为90.9%和93.2%,特异度分别为89.5%和92.9%.结论 在痰涂片阴性的肺结核患者中,采用Xpert MTB/RIF Ultra检测法比Xpert MTB/RIF检测法对MTB有更高的检出率.在耐药肺结核患者中,Xpert MTB/RIF Ultra检测法有较高的灵敏度,且所需时间较短,可快速检测出MTB及其对RIF的耐药性,具有很好的临床实用价值.