基于核蛋白的麻疹病毒IgG抗体间接ELISA检测方法的建立及应用

目的 以原核系统表达的麻疹病毒核蛋白作为包被抗原,初步建立检测麻疹病毒抗体的间接ELISA方法,并将其应用于人群抗体水平的评估.方法 对各项实验条件进行筛选和优化,确定间接ELISA法的操作流程,并检测了157份健康儿童和新生儿母亲血清中的抗麻疹病毒IgG抗体,与商品化麻疹病毒ELISA IgG抗体检测试剂盒进行比较.结果 本研究建立的间接ELISA方法批内和批间的重复性试验变异系数均小于10％,与试剂盒检测结果相比,血清标本的总符合率为95.5％,灵敏度和特异度分别可达94.8％和98.3％.其中,两种方法检测的85份0～15岁健康儿童血清麻疹病毒IgG抗体阳性率,无论是＜8月龄组或8月龄～15岁组,结果差异均无统计学意义(X2=0.313,P＞0.05;X2=0.000,P＞0.05),且通过本研究所建立的ELISA方法检测的麻疹病毒抗体水平表现出与试剂盒检测结果在不同年龄组一致的增减趋势,两种方法定量结果的相关系数r为0.893(P＜0.001),显示出该方法具备的定量潜力.结论 本研究建立的ELISA方法具有良好的稳定性,且灵敏度高、特异度强,与商品化试剂盒检测结果无明显差异,可用于麻疹病毒血清流行病学调查和疫苗免疫后人群抗体水平的评估.