微小RNA-497对膀胱癌上皮-间充质转化过程的影响

目的 观察微小RNA(miRNA,miR)-497在膀胱癌细胞株中的表达,探讨miR-497对膀胱癌上皮-间充质转化(EMT)过程的影响.方法 采用实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-497在膀胱细胞株和正常膀胱黏膜组织中的表达.将miR-497 mimics/inhibitor分别瞬时转染至膀胱癌EJ细胞中,通过显微镜细胞形态学观察、细胞划痕实验、Transwell侵袭实验,分析过表达或下调内源性miR-497的表达对EJ细胞形态、迁移和侵袭的影响;Western blot法检测EMT标志物相关蛋白表达的变化.结果 与膀胱永生化上皮细胞(SV-HUC-1),miR-497在5株膀胱癌细胞株中均呈低表达状态(P =0.000).过表达miR-497后,EJ细胞表现为上皮样细胞形态,EJ细胞的迁移率为(25.33 ±6.11)％,较其阴性对照组(74.00±3.61)％降低2.96倍,侵袭细胞个数为(109 ±3)个,较其阴性对照组[(219±17)个]降低2倍;而抑制miR-497表达后,EJ细胞表现为间质样细胞形态,EJ细胞的迁移率为(74.00±3.61)％,较其阴性对照组[(51.33±6.51)％]增加1.45倍,侵袭细胞个数为(320±14)个,较其阴性对照组[(248±16)个]增加1.29倍.Westem blot结果显示:与阴性对照组比较,过表达miR-497可使EJ细胞的E-钙黏素(E-cadherin)表达增加(P =0.000),N-钙黏素(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)表达减少(P=0.001,P=0.000).结论 miR-497可能参与膀胱癌EMT过程的调节.