姜黄素光动力学治疗对宫颈癌细胞Notch信号通路的影响

目的 以姜黄素为光敏剂的光动力治疗(PDT)宫颈癌Me180细胞的实验中,加入Notch受体阻断剂N-[N-(3,5-二氟苯乙酰基-L-丙氨酰基)]-(S)-苯基甘氨酸叔丁酯(DAPT),探究Notch信号通路在PDT治疗官颈癌中的作用机制.方法 以不同浓度DAPT联合姜黄素PDT对Me180细胞处理后,3-(4,5)-双甲基噻唑-(2,5)-二苯基溴化四氮唑蓝(MTT)法检测对Me180细胞增殖的影响,Annexin V-FITC/PI结合流式细胞术检测对细胞凋亡的影响,实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测对Notch1基因mRNA水平的影响,免疫印迹反应(Western blot)检测蛋白对表达的影响.结果 1.0 μmol/L及以上剂量的DAPT对宫颈癌Mel80细胞有抑制作用.姜黄素PDT和DAPT均可抑制宫颈癌Me180细胞Notch1的mRNA水平,抑制率分别为32.3％和40.0％.姜黄素PDT和DAPT联合应用抑制Notch1具有增效作用,与对照组和姜黄素PDT组比较,差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).DAPT和姜黄素PDT抑制核因子(NF)-κB、血管内皮生长因子(VEGF)的蛋白表达,二者联用后有协同增效作用.结论 DAPT和姜黄素PDT均可有效阻断NOTCH信号通路的传导,其作用与Notch1、NF-κB的表达下调有关.NOTCH信号通路可能是姜黄素PDT的作用靶点之一.