Toll 样受体4对氧化型低密度脂蛋白诱导巨噬细胞凋亡的影响及其机制研究

目的：探讨Toll样受体4（ TLR4）对氧化型低密度脂蛋白（ oxidized low density lipopro-tein，ox-LDL）诱导的巨噬细胞凋亡的影响及其机制研究。方法体外培养THP-1细胞，用PMA（丙二醇甲醚醋酸酯）诱导成巨噬细胞，分别设立正常对照组、ox-LDL组、ox-LDL＋LPS组、衣霉素组，用MTT和流式细胞术检测细胞存活率及凋亡情况、油红O染色观察细胞吞噬脂质情况，q-RT-PCR、Western blot检测内质网应激相关基因及葡萄糖调节蛋白78（glucose-regulated protein78， GRP78）和CCAAT／增强子结合蛋白同源蛋白（ CCAAT／enhancer-binding protein homologous protein ， CHOP ）的表达情况，并且用TLR4-siRNA抑制TLR4活性观察其对通路的影响。结果流式及MTT结果显示ox-LDL＋LPS组的凋亡细胞数较ox-LDL组明显增加（P＜0．01）， ox-LDL＋LPS组的内质网应激相关基因和蛋白GRP78、CHOP均较ox-LDL组增加，且两组都明显大于正常对照组（ P＜0．01），抑制TLR4活性后内质网应激程度明显减轻（ P＜0．05）。结论 TLR4加重ox-LDL诱导的巨噬细胞凋亡，其机制是加重内质网应激程度，增加CHOP表达，起到促凋亡作用。