西罗莫司和sTNFRI-IgGFc基因修饰联合应用抑制树突状细胞成熟

目的 观察应用西罗莫司联合可溶性肿瘤坏死因子受体I(sTNFRI)-IgGFc基因转染对大鼠骨髓源性树突状细胞(DC)形态、表型、功能和分化的影响及抑制DC成熟的作用.方法 获取和培养Wistar大鼠骨髓源性DC.实验分5组,未成熟DC组(imDC组),成熟DC组(mDC组),西罗莫司组(经西罗莫司处理的DC),sTNFRI基因转染组(转染sTNFRI-IgGFc基因的DC)与联合处理组(经西罗莫司处理和sTNFRI基因转染的DC).采用流式细胞技术检测各组DC表面分子MHCⅡ、CD80、CD86的表达情况,进行单向式混合淋巴细胞反应后进行MTT实验检测各组DC活化T淋巴细胞能力,采用酶联免疫吸附试验试剂盒检测各组DC培养上清液中白细胞介素12(IL-12)、γ干扰素(IFN-γ)及sTNFRI-IgGFc蛋白的表达状况.结果 培养第10天,rnDC组DC表面MHCⅡ、CD80、CD86的表达量显著高于其他4组(P＜0.05);联合处理组较imDC组CD86的表达显著降低(P＜00.05).mDC组DC刺激T淋巴细胞增殖能力显著高于其他4组(P＜0.05),联合处理组显著低于imDC组、mDC组和西罗莫司组(P＜0.05).mDC组培养液中IL-12和INF-γ的含量显著高于其他4组(P＜0.05),而联合处理组较其他4组培养液中IL-12和INF-γ的水平显著降低(P＜0.05).结论 西罗莫司和sTNFRI-IgGFc基因修饰均能抑制DC的成熟,二者联合应用具有协同效应,较单独使用具有更强地抑制DC成熟的作用.