大鼠肺泡上皮细胞自噬对内质网应激的影响

目的 观察大鼠肺泡上皮细胞CCL149自噬对内质网应激的影响.方法 将绿色荧光蛋白-微管相关蛋白1轻链3(GFP-LC3)质粒导入CCL149细胞,筛选出稳定表达GFP-LC3的细胞株.在分别加入自噬激活剂雷帕霉素和自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)后,观察大鼠肺泡上皮细胞经缺氧复氧2、4、6h时细胞自噬变化及相应的内质网应激反应.结果 在缺氧复氧2、4、6h这3个时间点,加入3-MA组自噬基因GFP-LC3表达量显著低于对照组(=6.317,P=0.024;t=8.583,P=0.013;t =6.341,P=0.026),Beclin-1表达量显著低于对照组(t=4.658,P=0.039;t7.120,P =0.022;t 10.320,P=0.000),p62表达量显著低于对照组(t=5.906,P=0.015;t=7.032,P=0.019;t =7.072,P=0.032),而内质网应激基因免疫球蛋白结合蛋白(BIP)表达量显著高于对照组(t=5.988,P=0.012;=9.473,P=0.004;t=12.863,P=0.000),X-盒结合蛋白(XBP-1)表达量显著高于对照组(t=4.285,P=0.043;t=9.563,P=0.008;t=10.531,P=0.000),C/EBP同源蛋白(CHOP)表达量显著高于对照组(=5.477,P=0.031;t=8.373,P=0.016;t =8.954,P=0.025);加入雷帕霉素组自噬基因GFP-LC3表达量显著高于对照组(t=4.502,P=0.046;t =10.000,P=0.010;t =4.983,P=0.041),Beclin-1表达量显著高于对照组(t=5.161,P=0.029;=5.767,P=0.029;t=9.342,P=0.012),p62表达量显著高于对照组(t=6.687,P=0.026;t=7.084,P=0.016;t =9.767,P=0.000),而内质网应激基因BIP表达量显著低于对照组(t=7.245,P=0.016;t=8.432,P=0.005;t=12.562,P=0.000),XBP-1表达量显著低于对照组(t=6.255,P=0.022;t=8.450,P=0.029;t=8.365,P=0.035),CHOP表达量显著低于对照组(t=7.048,P=0.014;t=11.566,P=0.000;t=10.144,P=0.000).结论 在大鼠肺泡上皮细胞缺血缺氧早期,增强细胞自噬可减弱内质网应激.