环介导等温扩增法检测动植物源性单核细胞增生李斯特氏菌

目的 采用环介导等温扩增技术检测动植物源性单核细胞增生李斯特氏菌.方法 在北京市范围内各业态餐厅购买600份凉菜样品为研究对象,以单核细胞增生李斯特氏菌的hlyA基因为目标基因,设计4条特异性引物,使用环比等温扩增法(loop-to-isothermal amplification,LAMP)创建凉菜中单核细胞增生李斯特氏菌快速检测方法并将其应用于鉴定凉菜中分离的单核细胞增生李斯特氏菌.结果 通过细菌分离培养法对600份凉菜进行检测,一共检测分离出37株致病菌菌株,其中包括7株单核细胞增生李斯特氏菌、10株沙门氏菌和20株大肠埃希氏菌,单核细胞增生李斯特氏菌的检出率为1.2％.用LAMP对样品中的菌株进行测定,7 株凉菜中分离的单核细胞增生李斯特氏菌为阳性,其他菌株为阴性.通过 LAMP 方法检测动植物源性凉菜中分离的单核细胞增生李斯特氏菌平均检出限为2.2*10 CFU/μL、特异性为100％.动物源性凉菜中的致病菌含量较高.结论 环介导等温扩增法具备灵敏、快速、操作简便的特点,适合用于餐饮行业的现场快速检测领域.