扁果枸杞肌动蛋白基因片段的克隆及其表达特征分析

Food and Fermentation Industries(2019)

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摘要
为克隆扁果枸杞(Lycium barbarum Bianguo)肌动蛋白基因作为基因表达模式分析的内参基因,根据几种茄科植物肌动蛋白氨基酸序列保守区设计引物,以扁果枸杞3周龄叶总RNA为模板,采用RT-PCR的方法扩增肌动蛋白基因片段并连接到pMD18-T载体上,阳性克隆经PCR检测后测序.结果表明,该基因片段长598 bp,编码198个氨基酸,与枸杞(Lycium chinense)核苷酸序列的相似度和同源性分别达97%和100%,说明是肌动蛋白基因片段,命名为LbACT.荧光定量PCR分析表明,盐处理下LbACT基因在各器官中的Ct值稳定,可作为内参基因用于研究扁果构杞功能基因的表达模式分析.
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