PTTG1在D-GalN/TNF-α所致LO2肝细胞损伤中的变化及对细胞凋亡的影响

目的 探讨垂体肿瘤转化基因1(PTTG1)在D-半乳糖胺(D-GalN)/TNF-α 所致LO2肝细胞损伤中的变化,以及对细胞凋亡的影响和机制.方法 通过蛋白免疫印迹法和免疫组织化学检测D-GalN/TNF-α 作用前后LO2肝细胞中PTTG1的表达情况,使用PTTG1 shRNA慢病毒建立PTTG1干扰的LO2肝细胞稳转株,并通过蛋白免疫印迹法和RT-PCR检测细胞凋亡相关蛋白cleaved Caspase-3和内质网应激通路相关基因糖调节蛋白(GRP 78)、CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)的表达.结果 D-GalN/TNF-α 作用于LO2肝细胞0.5 h后PTTG1蛋白表达开始逐渐增加,1 h至24 h后PTTG1蛋白表达均高于未处理组(P均<0.05);与未处理组相比,D-GalN/TNF-α 作用6 h后的LO2肝细胞免疫组织化学PTTG1阳性细胞数增加(P均<0.05).与阴性对照组相比,PTTG1稳定干扰的LO2肝细胞中的cleaved Caspase-3及GRP 78、CHOP表达增加(P<0.05).结论 PTTG1在D-GalN/TNF-α 所致的LO2肝细胞损伤中表达增加,且干扰PTTG1的表达可促进LO2肝细胞凋亡并激活GRP 78/CHOP内质网应激通路.