TNFα诱导蛋白3在人真皮成纤维细胞向肌成纤维细胞表型转化中的作用及机制

目的 探究TNFα诱导蛋白3(A20蛋白)在人真皮成纤维细胞(Fb)向肌成纤维细胞(MFb)表型转化中的作用及机制.方法 通过酶消化法分离培养原代人正常皮肤Fb (NFb)和瘢痕皮肤Fb(HFb),取对数生长期3～5代细胞进行试验,转化生长因子-β(TGF-β)刺激Fb模拟Fb向MFb转化过程,采用细胞转染敲除Fb中A20的表达,qRT-PCR、Western blot检测Fb中A20、Ⅰ型胶原(Col Ⅰ)、Ⅲ型胶原(Col Ⅲ)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、p-Smad 2等变化.结果 与NFb相比,HFb中A20低表达(P ＜0.05);TGF-β刺激Fb后,A20表达显著降低(P＜0.05),Col Ⅰ、Col Ⅲ及α-SMA等纤维化相关分子表达显著升高(P＜0.05),p-Smad 2表达显著升高(P＜0.05);敲除Fb中的A20,可进一步促进TGF-β诱导的Col Ⅰ、Col Ⅲ及α-SMA等纤维化相关分子及p-Smad 2表达的升高(P＜0.05).结论 A20蛋白参与了人真皮Fb向MFb表型转化的过程,并通过抑制Smad信号通路的活化,对TGF-β所介导的转化效应起负性调控作用.