siRNA抑制PTTG1表达对人脑胶质瘤细胞增殖、侵袭性的影响

目的：构建针对人脑胶质瘤细胞系的高效沉默PTTG1的RNAi载体；探讨PTTG1 siRNA干扰质粒对人脑胶质瘤细胞系U373增殖、侵袭性的影响。方法设计三对PTTG1基因干扰序列，合成能够特异干扰PTTG1的siRNA，然后将其与pGenesil2载体连接，构建pGenesil2-PTTG1 siRNA干扰载体，在脂质体作用下将PTTG1 siRNA质粒转染至胶质瘤U373细胞后，用RT-PCR和Western blot方法检测PTTG1 mRNA及蛋白表达水平的变化，通过细胞增殖实验、划痕实验和Transwell小室实验检测PTTG1对胶质瘤细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响。结果在胶质瘤U373细胞转染3个不同的siRNA片段干扰PTTG1的表达，RT-PCR检测结果显示，PTTG1 siRNA1干扰质粒对PTTG1表达的抑制作用最明显[（0.47±0.12）vs（1.00±0.15）， P＜0.01]。转染PTTG1 siRNA质粒的胶质瘤细胞U373在48h和72h细胞增殖能力均显著低于对照组。细胞划痕实验显示干扰PTTG1可明显缩短U373细胞的迁移距离；Transwell小室结果显示干扰PTTG1后U373的穿膜细胞百分率明显下降[（58.00±8.72）％vs（36.3±7.76）％，P＜0.05]。结论 PTTG1 siRNA干扰质粒可明显抑制胶质瘤U373细胞PTTG1的表达，并可抑制胶质瘤细胞的增殖、侵袭及迁移能力。