过表达SIRT1对脊神经结扎大鼠病理性疼痛的影响及机制

目的 探讨过表达沉默信息调节因子1(SIRT1)对脊神经结扎(SNL)大鼠病理性疼痛的影响及机制.方法 将大鼠随机分为假手术组、Cont-shRNA组、SIRT1-shRNA组,每组18只.采用L5脊神经结扎法制备SNL模型,假手术组仅暴露脊神经不进行结扎处理,经鞘内注射25 μL生理盐水,每天注射1次,连续7d;Cont-shRNA、SIRT1-shRNA组SNL模型制备成功后鞘内分别注射25 μL的Cont-shRNA、SIRT1-shRNA,均每天注射1次,连续7d.于第1、3、7天时,每组取6只,记录大鼠机械刺激缩足反应阈值(PWT)、热刺激缩足反应潜伏期所用时间(Pr-WL),采用免疫印记法检测脊髓组织中SIRT1、乙酰化组蛋白H3(Ac-H3)蛋白表达,免疫荧光染色法观察星形胶质细胞活化情况;ELISA法检测脊髓组织中TNF-α、IL-1β、IL-6表达;电镜下观察脊髓神经元超微结构,免疫印记法检测脊髓组织中凋亡相关蛋白表达.结果 与假手术组相比,第1、3、7天Cont-shRNA组SIRT1蛋白表达降低(P均＜0.05),Ac-H3蛋白表达升高(P均＜0.05),PWT、PTWL降低(P均＜0.05),胶质纤维酸性蛋白(GFAP)阳性细胞数量升高(P均＜0.05);TNF-α、IL-1β、IL-6水平升高(P均＜0.05);GFAP蛋白表达升高(P均＜0.05),Bcl-2蛋白表达降低(P均＜0.05),Bax、cleaved-Caspase-3蛋白表达升高(P均＜0.05).与Cont-shRNA组相比,SIRT1-shRNA组SIRT1蛋白表达升高(P均＜0.05),Ac-H3蛋白表达降低(P均＜0.05),PWT升高(P均＜0.05),GFAP阳性细胞数量降低(P均＜0.05);TNF-α、IL-1β、IL-6表达降低(P均＜0.05);GFAP、Bax、cleaved-Caspase-3蛋白表达降低(P均＜0.05),Bcl-2蛋白表达升高(P均＜0.05).结论 过表达SIRT1可减轻SNL大鼠病理性疼痛,其机制可能与降低Ac-H3蛋白表达、抑制星形胶质细胞活化、降低神经元凋亡有关.