siRNA沉默ARC对低氧下大鼠肺动脉平滑肌细胞活力的影响

目的 利用小干扰RNA(siRNA)技术干扰大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)含胱冬肽酶富集功能域的凋亡抑制因子(ARC)的表达,验证ARC在PASMCs活力变化中的作用.方法 体外培养PASMCs,分为常氧组、缺氧组、siRNA-Negative+缺氧组、siRNA-ARC+缺氧组.采用CCK-8法检测细胞活力情况,免疫荧光染色法及Western blot检测ARC在PASMCs中的表达,RT-PCR法分别检测caspase-3、Fadd、Bcl-2、Bad mRNA表达.结果 低氧下PASMCs活力较常氧下增加,并呈时间依赖性;与siRNA-Negative+缺氧组比较,siRNA-ARC+缺氧组的PASMCs活力受到抑制;siRNA-ARC+缺氧组PASMCs的caspase-3、Bad、Fadd mRNA表达较siRNA-Negative+缺氧组增加,而Bcl-2 mRNA表达较siRNA-Negative+缺氧组减少(P<0.05).结论 ARC参与调控低氧下大鼠PASMCs生长,对PASMCs活力具有一定的增强作用,可能是促凋亡因子及抗凋亡因子共同作用的结果.