两种白细胞滤器获取单个核细胞作为实验研究的生物学功能的比较

目的:分析单采血小板去白细胞滤器(apheresis platelet leukoreduction system chambers,LRSCs)和全血去白细胞滤器(whole blood leukoreduction filters,LRFs)所收集的白细胞替代常规人全血白细胞进行实验的相关生物学功能和表型.方法:分别采用直接法和反冲洗获得LRSCs和LRFs白细胞,经人的淋巴细胞分离液进行密度梯度离心,分离出外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs).用CD3激发型抗体和细胞因子白细胞介素2(interleukin,IL-2)体外扩增培养10 d,观察细胞形态、细胞增殖、细胞凋亡,并用流式细胞术(flow cytometry,FCM)进行表型分析,对比两种滤器分离出的白细胞生物学差异.结果:(1)PBMCs镜下观察:LRSCs中细胞较纯,个体大小较均一;LRFs包含部分形态较小的血小板和形态较大的粒细胞.两者细胞活力无差异.(2)LRSCs所分离的PBMCs细胞亚群以淋巴细胞为主,单核细胞次之,含极少量的粒细胞;而LRFs淋巴细胞与粒细胞比例接近,单核细胞较少.初始状态淋巴细胞群体中各细胞亚群表型相似.(3)LRSCs-PBMCs细胞,经CD3与IL-2体外刺激后,细胞活化集落大且较均一,而LRFs-PBMCs细胞集落多但分布较散.(4)体外培养第6天、第10天两组滤器间淋巴细胞各亚群表型差异无统计学意义.(5)两种滤器血PBMCs细胞凋亡率类似,且均为早期凋亡细胞比例高于晚期凋亡细胞.(6)经体外扩增培养10 d,发现两种滤器血PBMCs细胞增殖速率相当,细胞活力等同.结论:两种滤器所得的白细胞均可用于相关的基础实验研究,且L R Fs含有较多的粒细胞,这也为粒细胞的研究工作提供了便利,解决了临床用血与实验用血的需求.