联合应用MS-275和MDV3100对前列腺肿瘤干细胞样微球的作用

目的:探讨雄激素受体 (androgen receptor, AR) 拮抗剂和组蛋白去乙酰化酶 (histone deacetylase, HDAC) 抑制剂对前列腺肿瘤干细胞样微球的作用, 并探讨其可能的分子机制.方法:采用无血清悬浮培养前列腺LNCaP和22RV1肿瘤细胞以获取干细胞样肿瘤微球细胞, 然后单独和联合使用AR拮抗剂MDV3100和HDACⅠ类抑制剂MS-275分别处理2种微球细胞, 镜下观察细胞形态, 评估其克隆形成能力.应用实时荧光定量聚合酶链反应检测微球细胞中CD133的转录水平, Western blot检测DNA损伤标志物磷酸化H2A.X (p-H2A.X) 的表达和细胞凋亡标志蛋白聚ADP-核糖聚合酶 (PARP) 特异性裂解片段的水平, 同时检测Wnt信号通路关键分子β-catenin以及原癌基因c-Myc、cyclin D1蛋白表达情况.结果:MDV3100单独处理能明显降低肿瘤干细胞标志物CD133的表达;而MS-275单独或联合MDV3100处理均能明显抑制肿瘤干细胞样肿瘤微球的形成、降低肿瘤微球细胞CD133的表达, 并促进肿瘤微球细胞产生PARP的特异性裂解, 使p-H2A.X表达水平升高, 同时可以明显降低β-catenin、c-Myc及cyclin D1的表达.结论:联合应用MS-275和MDV3100可以显著增强MDV3100的抗肿瘤活性, 具体表现在抑制肿瘤干细胞样微球细胞生成及克隆形成、损伤细胞的DNA、诱导细胞凋亡等.该结果为临床联合应用HDACⅠ类抑制剂MS-275和AR拮抗剂MDV3100治疗前列腺肿瘤提供了一定的实验依据.