吡非尼酮对人椎板切除术后硬膜外瘢痕细胞的作用及机制研究

目的 探讨吡非尼酮对人椎板切除术后硬膜外瘢痕细胞的作用及机制.方法 采用体外组织块培养人硬膜外瘢痕细胞并建立细胞系,分别加入不同浓度的吡非尼酮培养,CCK-8法检测细胞活力,细胞划痕法观察细胞迁移,TUNEL法检测细胞凋亡,Western blot分析转化生长因子β1(TGF-β1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原蛋白、Smad2、磷酸化的Smad2(phospho-Smad2)、Smad3、磷酸化的Smad3(phospho-Smad3)表达.结果 成功分离培养人硬膜外瘢痕成纤维细胞.吡非尼酮可抑制成纤维细胞的活性(P<0.05),且并未增加成纤维细胞的凋亡(P>0.05).吡非尼酮可抑制细胞的迁移,并抑制α-SMA、Ⅰ型胶原蛋白表达及细胞增殖相关蛋白的表达和磷酸化.结论 吡非尼酮可抑制瘢痕成纤维细胞的活性及迁移,其机制可能是通过抑制TGF-β/Smad通路及肌成纤维细胞转化实现的.