光辉霉素A调节肾上腺髓质素表达改善帕金森病模型小鼠行为学异常

目的 探讨光辉霉素A(mithramycin A,MMA)通过调节肾上腺髓质素(adrenomedullin,ADM)表达改善帕金森病(Par-kinson's disease,PD)模型小鼠行为学异常的机制.方法 12.5周龄雄性C57BL/6小鼠40只随机分为对照组,1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine,MPTP)毒性组,MMA与MPTP联合注射组和MMA单独注射组.采用腹腔注射MPTP的方法建立PD小鼠模型.造模成功后进行小鼠自主活动和避暗实验行为学检测,记录小鼠穿格次数、站立次数及避暗实验潜伏期.同时使用TH免疫荧光染色检测小鼠中脑纹状体多巴胺能神经纤维密度,采用ELISA方法检测小鼠纹状体中ADM表达水平.并进一步在1-甲基-4-苯基-吡啶离子(1-methyl-4-phenylpyridinium,MPP+)诱导的SH-SY5Y细胞PD模型中通过染色质免疫共沉淀(chromatin immunoprecipitation,ChIP)实验观察SP1与ADM启动子DNA结合及转录活性变化.结果 与对照组相比,MPTP毒性组避暗实验潜伏期显著缩短(P<0.05).MMA单独注射组与对照组相比在小鼠行为学检测中未见明显变化.MMA+MPTP组则显著改善了MPTP造成的避暗实验潜伏期的缩短(P<0.05).MMA单独注射组纹状体TH免疫荧光显示MPTP导致纹状体中多巴胺能神经纤维密度降低(P<0.05),但MMA可以明显减少TH阳性神经纤维密度信号丢失(P<0.05).ELISA结果显示MPTP毒性升高了小鼠纹状体中ADM的水平(P<0.05),当联合注射MMA后可以使升高的ADM水平降低(P<0.05).此外,ChIP结果提示了MMA可以抑制MPP+诱导的SP1与ADM启动子结合转录活性的增强.结论 MMA通过抑制SP1转录活性调控肾上腺髓质素表达,对PD模型小鼠具有神经保护作用.