miR-218-2-3P靶向SIN3A基因影响NK/T细胞淋巴瘤的增殖和凋亡

目的·探讨miR-218-2-3P在NK/T细胞淋巴瘤中的表达情况,及其通过靶向SIN3A基因对NK/T细胞淋巴瘤增殖、凋亡及周期的影响.方法·采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)检测miR-218-2-3P在正常人NK细胞和NK/T细胞淋巴瘤细胞NK92MI、NKYS中的表达.采用脂质体3000瞬时转染法向NK92MI细胞分别转染含无义序列的抑制剂(inhibitor NC)、miR-218-2-3P抑制剂(miR-218-2-3P inhibitor)及不含片段的转染试剂,并采用qPCR和蛋白质印迹法(Western blotting)分别检测上述3组即inhibitor NC组、miR-218-2-3P inhibitor组及空白对照组细胞中miR-218-2-3P及SIN3A蛋白的表达水平.通过CCK8法检测3组细胞的增殖活力.利用流式细胞仪检测3组细胞的凋亡率和周期.采用双荧光素酶报告基因实验检测SIN3A是否为miR-218-2-3P的靶基因.向NK92MI细胞分别转染miR-218-2-3P inhibitor+SIN3A干扰小RNA(si-SIN3A)、miR-218-2-3P inhibitor+含无义序列的干扰小RNA(si-NC),并采用CCK8法检测该2组细胞的增殖活力.结果·与正常人NK细胞相比,NK92MI细胞、NKYS细胞中miR-218-2-3P的表达显著升高(均P<0.05).与空白对照组和inhibitor NC组相比,miR-218-2-3P inhibitor组NK92MI细胞的增殖活力减弱(均P<0.05)、凋亡率增加(均P<0.05)且发生了G0/G1期细胞周期阻滞(均P<0.05).双荧光素酶报告基因实验显示SIN3A为miR-218-2-3P的靶基因.与空白对照组和inhibitor NC组相比,miR-218-2-3P inhibitor组的SIN3A蛋白表达水平升高(均P<0.05).下调SIN3A表达,能够恢复由转染miR-218-2-3P inhibitor减弱的细胞增殖活力(均P<0.05).结论·miR-218-2-3P 在NK92MI、NKYS细胞株中表达较高,其可能通过靶向调控SIN3A对NK/T细胞淋巴瘤的增殖、凋亡及周期产生影响.