五味子脂A联合卡铂对人卵巢癌Skov3细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用及其机制

目的:探讨五味子脂 A(GA)与卡铂(CBP)联用对人卵巢癌 Skov3细胞增殖、迁移与侵袭的抑制作用及其机制,阐明 GA的协同抑瘤作用.方法:采用不同浓度 GA与 CBP单独或联合对卵巢癌 Skov3细胞株进行干预,MTT 法检测细胞增殖抑制率,根据其结果选择 GA 和 CBP 合适浓度.实验分为对照组、GA(0.04 μmol· L-1)组、CBP(16 mg· L-1)组、GA(0.04 μmol·L-1)联合 CBP(16 mg·L-1)组(GA+CBP组),药物处理48 h后,克隆形成实验检测细胞克隆形成能力,细胞划痕实验检测各组细胞迁移能力,Transwell实验检测各组细胞侵袭能力,RT-PCR法检测各组细胞中基质金属蛋白酶2(MMP-2)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)mRNA 表达水平,Western blotting 法检测各组细胞中 MMP-2、MMP-9、AKT1和pAKT1蛋白表达水平.结果:与 GA组和CBP组比较,GA+CBP组细胞增殖抑制率明显升高(P<0.01),且GA和CBP浓度分别为0.04 μmol·L-1、16 mg·L-1时量效比最佳.克隆形成实验,与对照组比较,CBP组和GA+CBP组 Skov3细胞克隆形成率均降低(P<0.05或P<0.01);GA+CBP组 Skov3细胞形成率明显低于GA组和CBP组(P<0.01).细胞划痕实验,与对照组比较,GA 组和 CBP 组 Skov3细胞迁移的数量减少;GA+CBP组细胞迁移的数量明显低于 GA 组和 CBP 组.Transwell 实验,与对照组比较,GA 组和 CBP 组Skov3细胞穿过细胞外基质(ECM)的能力降低;与 GA组和 CBP组比较,GA+CBP组 Skov3细胞穿过 ECM的能力降低.RT-PCR法,与 GA组和CBP组比较,GA+CBP组 Skov3细胞中 MMP-2和 MMP-9 mRNA表达水平明显降低(P<0.01);Western blotting法,与 GA组和 CBP组比较,GA+CBP组 Skov3细胞中 MMP-2、MMP-9、AKT1和pAKT1蛋白表达水平明显降低(P<0.01).结论:GA可增强CBP抑制人卵巢癌Skov3细胞增殖、侵袭和转移的能力,从而发挥化疗的减毒增效作用.