冠心病EAT中miR-455b-3p调控脂肪细胞分化及炎症因子

目的 筛选在冠状动脉粥样硬化性心脏病(CAD)患者和非冠心病(non-CAD)患者心外膜脂肪组织(EAT)中差异性表达的microRNAs(DE-miRNAs),探讨其中miR-455b-3p对脂肪细胞因子APN、Kruppel样因子4(KLF4)、白细胞介素6(IL-6)和单核细胞因子趋化蛋白Ⅰ(MCP-1)分泌及对脂肪细胞分化的影响.方法 收集冠心病(CAD) 34例和非冠心病(non-CAD) 16例EAT和血液标本,分别为实验组(CAD组)和对照组(Non-CAD组),采用miRNA芯片技术筛选出EAT中DE-miRNAs,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测标本中miR-455b-3p的表达水平.分别将miR-455b-3p的mimics、miR-455 b-3p的inhibitors和NC转染入前体3T3-L1细胞及已诱导成熟的3T3-L1细胞,分为上调组、下调组和NC组.采用qRT-PCR法检测转染24 h后细胞中APN、KLF4、IL-6、MCP-1 mRNA及脂肪细胞分化标志物过氧化物酶体增殖物激活受体-γ (PPARγ)、CCAAT/增强子结合蛋白α(C/EBPα)、脂肪酸结合蛋白4(FABP4) mRNA的相对表达水平.结果 与实验组比较,对照组EAT标本中共筛选出29个DE-miRNAs(P＜0.05;差异倍数＞2,差异有统计学意义),其中下调10个,上调19个.miR-455b-3p是与ADIPOQ 3'-UTR有互补结合位点或密切相关的1条DE-miRNA.qRT-PCR验证结果显示,与对照组比较,miR-455b-3p在实验组中的表达均升高.与NC组比较,转染miR-455 b-3p的mimics后,上调组成熟3T3-L1脂肪细胞中APN、KLF4 mRNA表达减少,IL-6、MCP-1 mRNA表达增多;脂肪细胞分化标志物PPARγ、C/EBPα、FABP4 mRNA表达升高;转染miR-455b-3p inhibitor后,下调组APN、KLF4 mRNA表达水平升高,IL-6、MCP-1 mRNA表达减少.结论 在CAD组患者EAT中存在差异性表达的miRNAs,其中miR-455b-3p高表达,miR455b-3p影响脂肪细胞因子APN、KLF4、IL-6以及MCP-1的表达,并且促进脂肪细胞分化成熟,从而影响冠心病的发生发展.