盐酸吡柔比星通过上调ATG4B增强HeLa细胞保护性自噬

目的 探讨盐酸吡柔比星增强宫颈癌HeLa细胞自噬水平的可能机制.方法 采用CCK-8检测盐酸吡柔比星单独或联用自噬抑制剂氯喹对HeLa细胞增殖的影响;台盼蓝染色实验检测盐酸吡柔比星单独或联用自噬抑制剂氯喹对HeLa细胞死亡的影响;GFP-LC3质粒转染HeLa细胞后观察盐酸吡柔比星对自噬小体形成的影响;Western blot检测细胞中自噬标志分子Ⅱ型微管相关蛋白轻链3(microtuble-associated protein light chain 3-Ⅱ,LC3-Ⅱ)、自噬相关分子自噬相关蛋白4B(autophapyrelated 4B,ATG4B)的表达情况.CCK-8实验及台盼蓝染色实验观察在有或者无自噬抑制剂氯喹作用下以及shRNA下调HeLa细胞中的ATG4B后盐酸吡柔比星对HeLa细胞的杀伤效应的影响.结果 盐酸吡柔比星能剂量依赖地抑制HeLa细胞的增殖并促进其死亡(P＜0.05);盐酸吡柔比星处理能显著增加HeLa细胞中自噬小体的数量,并显著上调自噬标志分子LC3-Ⅱ、自噬关键酶ATG4B的表达;自噬抑制剂氯喹可显著增强盐酸吡柔比星的杀细胞效应(P＜0.05),shRNA干扰ATG4B可抑制盐酸吡柔比星对HeLa细胞中自噬的增强作用(P＜0.05),并增强盐酸吡柔比星的杀细胞效应(P＜0.05).结论 盐酸吡柔比星通过上调ATG4B而增强的自噬对HeLa细胞起保护作用.