高效液相色谱法测定大鼠血浆和肺泡灌洗液中环丙沙星浓度

目的 建立一种测定大鼠血浆和肺泡灌洗液中环丙沙星浓度的高效液相色谱(HPLC)法.方法 用甲醇直接蛋白沉淀法、去离子水直接稀释法分别对血浆和肺泡灌洗液进行处理,离心取上清,以莫西沙星为内标,用HPLC测定.色谱柱:Agilent SB-C18柱(4.6mm×150mm,5μm),流动相:乙腈-0.1％甲酸水,流速:1.0mL·min-1,柱温:25℃,进样量:15 μL.考察该方法的专属性、标准曲线与最低定量下限、精密度与回收率、稳定性.结果 血浆和肺泡灌洗液中的内源性物质不影响环丙沙星的测定.在血浆和肺泡灌洗液中,环丙沙星分别在1.00～100.00 μg· mL-1(r =0.999 6)、0.05 ～2.00 μg· mL-1(r =0.998 5)内线性关系良好,最低定量下限分别为1.00和0.05 μg·mL-1.环丙沙星在血浆和肺泡灌洗液中的批内精密度分别为0.49％～ 3.77％和2.21％～ 5.00％,批间精密度分别为7.72％ ～8.83％和6.84％ ～ 9.51％,提取回收率分别为104.61％～113.29％和100.65％～103.96％;环丙沙星血浆和肺泡灌洗液稳定性符合相关要求.结论 该方法简单、准确、可操作性强,适用于伏立康唑大鼠血浆及肺泡灌洗液浓度测定.