预照射联合siRNA抑制小鼠肺癌Survivin基因表达的研究

背景与目的：肿瘤放化疗的效果与肿瘤细胞凋亡成正相关。Survivin是凋亡抑制基因，在肺癌中过度表达，降低其表达可增加肺癌细胞凋亡。RNA干扰可以特异、高效地封闭该基因的表达。肿瘤组织接受一定剂量的照射后，也可以提高基因转导率。本研究旨在探讨预照射联合瘤内注射siRNA对小鼠肺癌Survivin基因表达的影响。方法：将皮下移植瘤小鼠随机分为4组：未处理组(A组)、单纯siRNA瘤内注射组(B组)、单纯放射组(C组)和4 Gy预照射+siRNA瘤内注射组(D组)。小鼠经上述不同处理2 d后用颈椎脱臼法处死，剥离皮下移植瘤，采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR，qRT-PCR)和蛋白[质]印迹法(Western blot)检测Survivin基因在mRNA和蛋白水平的表达情况；采用流式细胞术检测细胞周期及细胞凋亡。结果：B组、C组、D组Survivin基因在mRNA和蛋白水平的表达均较A组减少，且D组与A组Survivin基因在mRNA和蛋白水平的差异有统计学意义(P=0.036)；D组处于S期的细胞比例为(2.70±0.34)%，较B组[(8.93±0.75)%]和C组[(6.71±0.51)%]明显减少，且与A组S期细胞的比例相比，差异有统计学意义(P=0.034)；D组肿瘤组织的细胞凋亡率为(25.6±0.65)%，较其他3组肿瘤组织的细胞凋亡率明显增多，差异有统计学意义(F=78.82， P<0.05)。结论：预照射可增强siRNA的转导率，使肺癌组织中Survivin基因表达水平降低，促进细胞凋亡，进而增加放疗敏感性。