内质网应激IRE-1/XBP-1参与调控肝癌进展的机制研究

目的 探讨内质网应激(ERS)调控内质网核信号转导蛋白a1(Endoplasmic reticulum to nucleus signaling 1,IRE-1)IRE-1/X-盒-结合蛋白-1(X box Binding Protein 1,XBP-1)XBP-1参与肝癌进展的机制研究.方法 用无水乙醇诱导正常肝细胞LO2、 高分化肝癌细胞株HepG2及高转移能力肝癌细胞株SMMC-7721细胞48 h获得内质网应激细胞模型;采用CCK-8法检测细胞的增殖情况;采用Hoechst 33258染色检测细胞凋亡情况;采用Real-time PCR和Western blot方法检测无水乙醇处理前后IRE-1、XBP-1、DNA损伤诱导基因153(CHOP)、Cleaved-caspase 12和Bcl-2 mRNA和蛋白含量表达.结果 无水乙醇诱导LO2、HepG2、和SMMC-7721细胞发生内质网应激后,细胞存活率显著降低,细胞凋亡明显升高,差异有统计学意义(P<0.05).无水乙醇诱导LO2、HepG2、和SMMC-7721细胞发生内质网应激后,LO2、HepG2、和SMMC-7721细胞内IRE-1、XBP-1、CHOP、Cleaved-caspase 12 mRNA和蛋白表达含量显著升高,其中细胞内mRNA和蛋白含量表达的高低次序为SMMC-7721、HepG2和LO2细胞,差异有统计学意义(P<0.05);Bcl-2 mRNA和蛋白表达含量显著降低,细胞内mRNA和蛋白含量表达的高低次序为LO2、HepG2和SMMC-7721细胞,差异有统计学意义(P<0.05).结论 内质网应激发生后LO2、HepG2和SMMC-7721细胞中IRE-1/XBP-1的表达水平显著升高,有效参与调控肝癌细胞的增殖发展.