骆驼蓬提取物β-咔啉类生物碱对SGC-7901及裸鼠移植瘤组织PI3K和AKT表达影响

目的 新疆地道药材骆驼蓬有抗肿瘤作用.本课题组通过前期实验表明,其提取物β-咔啉类生物碱有诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡的作用,但信号通路尚未明确.本研究拟探讨β-咔啉类生物碱对人胃癌SGC-7901细胞及裸鼠移植瘤组织中PI3K和AKT表达的影响.方法 使用β-咔啉类生物碱及氟尿嘧啶体外干预SGC-7901细胞,使用蛋白质印迹及RT-PCR法检测PI3K和AKT蛋白及mRNA的表达.构建裸鼠移植瘤模型,使用不同剂量β-咔啉类生物碱及氟尿嘧啶行体外干预,使用TUNEL法检测凋亡,同时使用蛋白质印迹、RT-PCR、免疫组化法检测PI3K、AKT表达.结果 在体外实验中,β-咔啉类生物碱组PI3K、p-PI3K mRNA表达为0.387±0.218、0.325±0.105,低于空白对照组的0.473±0.119和0.423±0.122及阳性对照组的1.003±0.101和1.001±0.201,F值分别为13.912和13.875,P值分别为0.006和0.056.阳性对照组AKT、p-AKT mRNA表达分别为0.679±0.061和0.621±0.043,低于空白对照组的1.001±0.065和1.021±0.037及β-咔啉类生物碱组的0.800±0.056和0.728±0.031,F值分别为8.036和49.747,P值分别为0.020和＜0.001.空白对照组PI3K、-PI3K蛋白表达分别为1.330±0.091和1.244±0.030,高于阳性对照组的1.321±0.194和1.006±0.082及β-咔啉类生物碱组的1.014±0.063和1.011±0.151,F值分别为5.837和5.439,P值分别为0.039和0.045.空白对照组AKT、p-AKT蛋白表达分别为0.934±0.037和0.903±0.129,高于阳性对照的0.887±0.041和0.788±0.054及β-咔啉类生物碱组的0.865±0.080和0.594±0.131,F值分别为11.531和5.973,P值分别为0.009和0.037.在体内实验中,β-咔啉类生物碱组与各组瘤质量相比较,F=4.659,P=0.009.在体内实验中,β-咔啉类生物碱高剂量组PI3K、p-PI3K mRNA表达分别为0.520±0.215和0.513±0.201,低于空白对照组的1.003±0.088和1.001±0.051及阳性对照组的0.517±0.146和0.521±0.212,F值分别为6.873和6.327,P值分别为0.006和0.005.β-咔啉类生物碱高剂量组AKT、p-AKTmRNA表达分别为0.765±0.121和0.732±0.101,低于空白对照组的1.001±0.047和1.004±0.032及阳性对照组的0.851±0.213和0.847±0.094,F值分别为1.227和1.319,P值分别为0.359和0.372.β-咔啉类生物碱高剂量组PI3K、p-PI3K蛋白表达分别为0.621±0.113和0.323±0.069,低于空白对照组的0.706±0.047和0.745±0.153及阳性对照组的0.631±0.105和0.550±0.243,F值分别为1.109和1.194,P值分别为0.409和0.377.β-咔啉类生物碱高剂量组AKT、p-AKT蛋白表达分别为0.435±0.067和0.400±0.118,低于空白对照组的0.536±0.098和0.807±0.161及阳性对照组的0.462±0.166和0.639±0.202,F值分别为5.946和0.417,P值分别为0.013和0.793.结论 在人胃癌SGC-7901细胞及裸鼠移植瘤组织中,β-咔啉类生物碱可降低PI3K和AKT蛋白和基因的表达,PI3K/AKT通路上可能有β-咔啉类生物碱作用的靶点.