异丙酚对IL-1β诱导人脐静脉内皮细胞通透性增高的影响

目的 评价异丙酚对IL-1β诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)通透性增高的影响.方法 原代分离培养HUVECs并用免疫磁珠法进行纯化.免疫荧光法检测内皮细胞VE-钙粘素的表达.使用Transwell系统检测HUVECs单层通透性,以每孔2× 105个内皮细胞接种于12孔Transwell系统嵌套膜上层,待生长至汇合后3d时以两种方式干预细胞.采用随机数字表法,将细胞分为6组(n=36):对照组不作任何处理,其余5组分别以1、2、5、10和20 ng/ml IL-1β干预24h；采用随机数字表法,将细胞分为5组(n=30):对照组不作任何处理,其余4组分别先以0、10、50和100 μnol/L异丙酚预处理30 min,再以10 ng/ml IL-1β干预24h.采用随机数字表法,将细胞分为3组(n=18):对照组不作任何处理,其余2组分别以50 μmol/L异丙酚处理30 min,再以10 ng/ml IL-1β干预24h或30 min.采用Western blot法检测HUVECs occludin蛋白、磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)及p-p38 MAPK的表达水平.结果 与对照组比较,5、10和20 ng/ml IL-1β呈浓度依赖性地增加HUVECs通透性(P＜0.05或0.01).10、50和100 μnol/L异丙酚可呈浓度依赖性地抑制IL-1β诱导HUVECs通透性增加(P＜0.01).IL-1β可下调HUVECs occludin蛋白表达,激活p38 MAPK信号通路,异丙酚可抑制IL-1β诱导的HUVECs occludin蛋白表达下调和p38 MAPK信号通路激活(P＜0.01).结论 异丙酚可减轻IL-1β诱导HUVECs通透性增高,与抑制p38 MAPK信号通路激活有关.