内质网应激在氯胺酮诱导大鼠神经元凋亡中的作用:离体实验

目的 评价内质网应激在氯胺酮诱导大鼠神经元凋亡中的作用.方法 大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞瘤PC12细胞,将细胞以5×105个/ml的密度接种于100 mm培养皿(10 ml/l)或6孔L板(2 ml/孔),采用随机数字表法,将其分为4组(n=6):对照组(C组)、氯胺酮组(K组)、内质网应激抑制剂salubrinal组(S组)和氯胺酮+salubrinal组(K+S组).C组常规培养;K组加入1.5 mmol/L氯胺酮;S组加入30 mmol/L salubrinal;K+S组加入1.5 mmol/L氯胺酮和30 mmol/L salubrinal,相应药物孵育24 h时进行下述项目的观察或指标的测定.光镜下观察细胞形态学,采用Western blot法检测Bip和caspase-12的表达,采用流式细胞术检测细胞凋亡情况.结果 与C组比较,K组和K+S组Bip和easpase-12表达上调,细胞凋亡率升高(P＜0.05),S组上述指标差异无统计学意义(P＞0.05);与K组比较,K+S组Bip和easpase-12表达下调,细胞凋亡率降低(P＜0.05).K组细胞损伤程度明显重于C组,K+S组细胞损伤程度明显轻于K组,而重于C组.结论 氯胺酮诱导大鼠神经元凋亡的机制与内质网应激增强有关.