晚期蛋白氧化产物对大鼠胰岛微血管内皮细胞体外增殖、迁移及再血管化功能的影响及机制研究

目的 探讨晚期蛋白氧化产物(AOPPs)对大鼠胰岛微血管内皮细胞(IMECs)体外增殖、迁移及再血管化功能的影响及可能机制.方法 分为空白对照(NC)组、鼠血清白蛋白(RSA)组、不同浓度AOPP组(100、200、300μg/ml)及AOPPs 200μg/ml+NADPH氧化酶抑制剂(Apocynin)组.CCK8试剂盒检测IMECs增殖活性;Transwell小室、Matrigal胶及显微镜下细胞计数法检测AOPPs对IMECs体外迁移及再血管化的影响;化学发光法检测还原型辅酶-Ⅱ(NADPH)氧化酶活性;免疫印迹检测磷酸化丝-苏氨酸激酶(p-Akt)、磷酸化内皮型一氧化氮合酶(p-eNOS)蛋白的表达及ELISA检测一氧化氮(NO)水平.结果 AOPPs可呈剂量、时间依赖性降低IMECs体外增殖能力、迁移能力及再血管化能力,增强细胞内NADPH氧化酶的活性,降低细胞内p-Akt、p-eNOS的表达水平以及细胞内NO的水平(P<0.05).结论 AOPPs可导致胰岛微血管内皮细胞增殖、迁移及再血管化功能受损,可能与下调p-Akt及p-eNOS的表达水平以及加强NADPH氧化酶介导的eNOS脱偶联有关.