性成熟SD大鼠超排及成熟卵母细胞玻璃化冷冻方法的比较

目的:优化性成熟SD大鼠超排卵效果及建立大鼠成熟卵母细胞冷冻方法.方法:对8周龄SD大鼠腹腔注射15 IU/100 g孕马血清促性腺激素(PMSG),48 h后注射2种不同剂量人绒毛膜促性腺激素(HCG),15 IU/100 g及7.5 IU/100 g进行超排,20～22 h后输卵管收集卵母细胞卵丘复合体,脱颗粒细胞获得形态良好的成熟卵子,比较不同剂量HCG的超排卵母细胞数,并通过玻璃化冷冻法对卵母细胞进行冷冻,根据不同冷冻时间分为5组,观察冷冻解冻后卵子存活率.结果:7.5 IU/100 g HCG剂量平均超排42.2枚卵母细胞,显著高于15 IU/100 g HCG剂量组;冷冻9 min组(94.29％)及冷冻6 min组(94.37％)玻璃化冷冻卵母细胞存活率最高,显著高于冷冻15 min组(50.70％)和冷冻3 min组(48.57％),显著高于冷冻12 min组(68.06％).结论:性成熟大鼠在15 IU/100 g PMSG及7.5 IU/100 g HCG剂量组合下,可获得最佳超排效果,玻璃化冷冻9 min组及冷冻6 min组能更好地保存大鼠卵母细胞.